ФГБУ «ВНИИЗЖ» провел исследования для определния титра инфекционной активности мастаденовируса собак в сырье для вакцин
В ФГБУ «ВНИИЗЖ» (г. Владимир) в 2023 г. проведены исследования по разработке «Методических рекомендаций по опосредованному определению титра инфекционной активности мастаденовируса собак в сырье для культуральных вакцин с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени», которые отражают итог научной работы по проведению исследований расчета титра инфекционной активности мастаденовируса собак с использованием средств молекулярной биологии.
Заражение мастаденовирусом собак было описано во всем мире у нескольких видов млекопитающих. Репликация вируса в эндотелиальных клетках сосудов и гепатоцитах приводит к развитию острого некрогеморрагического гепатита. Заболевание более тяжелое протекает у молодых животных. Передача происходит через контакт от животного к животному или опосредованно через контакт с инфекционной слюной, фекалиями, мочой или выделениями из дыхательных путей.
Система мер для борьбы с мастаденовирозом собак и его профилактики предусматривает иммунизацию животных. Для этой цели применяют вакцинные препараты. При их изготовлении вируссодержащее сырье исследуют на определение титра инфекционной активности CAdV для оценки его активности в клетках. Однако классические методы анализа имеют ряд ограничений по применению в рамках производственного процесса. В связи с этим целесообразно было провести разработку методических рекомендаций на основе альтернативного способа опосредованного определения титра инфекционной активности мастаденовируса собак в сырье для вакцин с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ).
Разработанная методика является воспроизводимой, а тест-система в ее основе имеет высокие показатели аналитической чувствительности и специфичности.
Основными преимуществами разработанной методики является возможность исключить вероятность контаминации в ходе реакции; снизить время проведения анализа вируссодержащего сырья для вакцины до 2,5 ч; увеличить специфичность и чувствительность анализа по определению титра инфекционной активности мастаденовируса собак.
Предлагаемая методика позволяет быстро и с высокой степенью достоверности определять титр инфекционной активности CAdV в сырье для вакцин.
Разработанные Методические рекомендации могут быть использованы в научно-исследовательских учреждениях при изготовлении культуральных вакцин против данного инфекционного заболевания.
На основании полученных результатов была подана заявка на патент РФ на изобретение «Способ опосредованного определения титра инфекционной активности мастаденовируса собак в сырье для вакцин методом ПЦР в режиме реального времени».
Аналогов данного изобретения в РФ на сегодняшний день не обнаружено. Разработка является оригинальной и актуальной и относится к средствам молекулярной диагностики в области ветеринарной вирусологии.