Российские ученые усовершенствовали метод лечения гепатита В с помощью «молекулярных ножниц»
Предложенный ими метод позволяет полностью избавить зараженные клетки печени от вируса. Результаты исследования, опубликованы в журнале Molecular Therapy: Nucleic Acid.
Гепатит В — опасное инфекционное заболевание, от которого ежегодно умирает около миллиона человек. Существующие на сегодняшний день методы лечения гепатита В не избавляют больных людей от вирусов, а лишь подавляют размножение возбудителя в организме. Терапия оказывается неэффективной, потому что в ядрах гепатоцитов — клеток печени — сохраняется кольцевая ДНК вируса. Единственный известный способ разрушить ее — разрезать «молекулярными ножницами», известными как система CRISPR/Cas9. Этот инструмент точно распознает определенные генетические последовательности, на которые его специально «нацеливают» ученые, и разрезает их, тем самым не давая ДНК вирусов работать.
С помощью молекулярных методов коллектив исследователей создал систему CRISPR/Cas9, нацеленную на замкнутую кольцевую ДНК вируса, которую не способны обнаружить обычные препараты. После этого специалисты протестировали ее работу в искусственных условиях — в культуре клеток человека.
Эксперимент продемонстрировал, что «молекулярные ножницы» уничтожают более 98 процентов соответствующих молекул ДНК, при этом сам комплекс CRISPR/Cas9 уже через сутки распадается. Ученые пришли к выводу — если применять его в организме человека, он не сможет повредить нецелевые участки в человеческой ДНК.
Исследование впервые показало, что, если в растворе присутствовала еще и релаксированная ДНК вируса, примерно через две недели на ее основе создавались полноценные молекулы замкнутой вирусной ДНК. Чтобы предотвратить это, ученые предложили совместно с CRISPR/Cas9 использовать специальный «подавитель» синтеза ДНК — препарат, который уже много лет используется в лечении пациентов с хроническим гепатитом В.
Ученые подтвердили эффективность этого подхода в опыте с культурой клеток печени, пораженных вирусом гепатита В. Они полностью избавились от присутствия обоих типов вирусной ДНК, что позволяет избежать рецидива заболевания.
«Предложенный нами подход может лечь в основу новых эффективных лекарств для лечения гепатита В. Уже сейчас наш коллектив разработал новый, эффективный способ доставки CRISPR/Cas9 в клетки печени, при котором система будет попадать только в пораженные вирусом клетки.», — заявил заведующий лабораторией генетических технологий в создании лекарственных средств Сеченовского университета Дмитрий Костюшев.
В исследовании также принимали участие ученые из ИМБ РАН, ФГБНУ ФНЦИРИП им. М. П. Чумакова РАН, ФГБУ «ЦСП» ФМБА России, НИИ МТ имени Н.Ф. Измерова, ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, МГУ имени М.В. Ломоносова и ФГБУ «НМИЦ ФПИ» Минздрава России.